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掌握熒光顯微鏡性質,ELISA的原理細胞復染的技巧




來源:責任編輯:yiyi
時間:2011-6-30 9:30:57

掌握熒光顯微鏡性質根據ELISA的原理,對細胞復染的技巧
一般要根據熒光顯微鏡的原理和性質來確認使用的激發塊類型
1)熒光原理是用短波長的光去激發標本,標本產生長波長的熒光。在光譜上,  461nm是藍色光,530nm是綠色光
      345nm是近紫外光(肉眼看不見)。

2)DAPI染料染細胞核,應使用激發波長359nm的紫外光去激發,選擇吸收波長461nm的濾色鏡來觀測藍色熒光。

3)染細胞質的綠色染料就該用激發波長345nm的近紫外光去激發,選擇吸收波長530nm的濾色鏡去觀察綠色熒光。

4)需明白你所使用的熒光激發塊,一般情況下熒光顯微鏡激發塊有窄帶和寬帶兩種。
(1)如你所用的近紫外激發塊是寬帶的,那么在熒光顯微鏡下應可以同時看到藍色的細胞核和綠色的細胞質;
         如只看到綠色細胞質,就很可能是你的激發塊選擇錯誤,你也許選擇了藍光激發,所以只能看見綠色的細胞質。
(2)如你所使用的近紫外激發塊是窄帶的,無論怎樣你將只能看到藍色或綠色其中一種,看主要看選什么波長激發。

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